Kỹ thuật PCR Other

Bài kiểm tra Chương 2: Kỹ thuật PCR

20 questions

45 min

Answer key

Exam info

Subject: Kỹ thuật PCR
Exam type: Other
Questions: 20
Duration: 45 min
Answers: ✓ With explanations

Questions (20)

Q 1.
Trong một chu kỳ PCR thông thường, nếu hiệu suất khuếch đại lý thuyết là 100% và bắt đầu với 2 bản sao DNA mục tiêu, sau 5 chu kỳ sẽ có bao nhiêu bản sao?
- A.
  32 bản sao
- B.
  64 bản sao
- C.
  16 bản sao
- D.
  128 bản sao
Q 2.
Một thí nghiệm PCR cho thấy đối chứng dương không có tín hiệu, trong khi NTC có tín hiệu. Kết luận nào là phù hợp nhất?
- A.
  Hệ phản ứng không hoạt động và đồng thời có nguy cơ nhiễm chéo DNA
- B.
  Chỉ cần báo cáo mẫu thử là âm tính
- C.
  Phản ứng PCR đã thành công và mẫu thử dương tính
- D.
  Chỉ cần tăng thêm nhiều chu kỳ PCR
Q 3.
Vì say phải sử dụng đầu tip có màng lọc và thực hiện PCR trong tủ hốt?
- A.
  Để tăng tốc độ kéo dài của DNA polymerase
- B.
  Để ngăn sản phẩm PCR từ lây nhiễm sang mẫu khác qua aerosol
- C.
  Để làm tăng độ đặc hiệu của các mồi PCR
- D.
  Để thay thế hoàn toàn đối chứng nội trong PCR
Q 4.
Nếu nhiệt độ bắt cặp quá cao so với nhiệt độ nóng chảy của các mồi, hiện quả PCR thường sẽ thay đổi theo hướng nào?
- A.
  Tăng mạnh do mồi bắt cặp nhanh hơn
- B.
  Giảm do mồi không bắt cặp đủ hiệu quả với DNA khuôn
- C.
  Không thay đổi vì nhiệt độ kéo dài vẫn là 72°C
- D.
  Tăng do DNA khuôn được biến tính hoàn toàn hơn
Q 5.
Hai mồi có Tm chênh lệch 5°C. Điều này có thể gây ra vấn đề gì trong PCR?
- A.
  Không thể tiến hành PCR vì PCR bắt buộc phải dùng hai mồi có Tm bằng nhau tuyệt đối
- B.
  Một mồi bắt cặp quá mạnh trong khi mồi còn lại bắt cặp yếu, làm mất cân bằng sản phẩm
- C.
  Làm DNA polymerase tự động sửa sai các mồi
- D.
  Chuyển PCR thành RT-PCR
Q 6.
Mẫu máu chứa heparin bị PCR âm tính giả. Nguyên nhân trực tiếp nhất phù hợp với cơ chế nào?
- A.
  Heparin làm tăng nồng độ Mg²⁺ và kích thích DNA polymerase
- B.
  Heparin ức chế hoạt động của DNA polymerase hoặc làm giảm hiệu quả của phản ứng
- C.
  Heparin làm thay đổi trình tự mồi thành trình tự bổ sung với DNA khuôn
- D.
  Heparin chuyển DNA khuôn thành RNA
Q 7.
Một nhà nghiên cứu muốn phát hiện đột biến hiếm trong DNA huyết thống với độ chính xác cao và không cần đường chuẩn định lượng. Kỹ thuật phù hợp nhất là?
- A.
  PCR thường kết hợp điện di gel agarose
- B.
  Nested PCR
- C.
  Digital PCR (dPCR)
- D.
  Multiplex PCR
Q 8.
Trong RT-PCR, enzyme reverse transcriptase có vai trò chính là gì?
- A.
  Tách hai sợi DNA trong bước biến tính
- B.
  Tổng hợp cDNA từ RNA khuôn
- C.
  Kiểm tra tín hiệu huỳnh quang trong từng chu kỳ
- D.
  Phân vùng mẫu thành hàng nghìn phân vùng nhỏ
Q 9.
Nếu dùng SYBR Green trong Real-time PCR, tín hiệu huỳnh quang tăng chủ yếu do điều gì?
- A.
  Thuốc nhuộm bám vào DNA kép được tạo ra trong phản ứng
- B.
  Mồi bị cắt đứt và phát hành chất phát huỳnh quang
- C.
  DNA khuôn bị phân hủy hoàn toàn
- D.
  Enzyme reverse transcriptase tạo RNA
Q 10.
Trong phương pháp 2^-ΔΔCt, nếu ΔΔCt của mẫu thử là -2, fold change được kỳ vọng là bao nhiêu?
- A.
  4 lần tăng
- B.
  2 lần tăng
- C.
  4 lần giảm
- D.
  0,25 lần tăng
Q 11.
Giá trị Ct thấp hơn ở mẫu thử so với mẫu đối chứng, trong cùng điều kiện qPCR, thường gợi ý:
- A.
  Mẫu thử có lượng DNA mục tiêu ban đầu nhiều hơn
- B.
  Mẫu thử chắc chắn chứa chất ức chế mạnh hơn
- C.
  DNA polymerase của mẫu thử hoạt động chậm hơn
- D.
  Mẫu thử không chứa DNA mục tiêu
Q 12.
Nested PCR khác PCR thường ở điểm nào?
- A.
  Dùng hai vòng PCR với cặp mồi ngoài và cặp mồi trong
- B.
  Chỉ dùng một cặp mồi nhưng thêm nhiều loại enzyme
- C.
  Bắt buộc sử dụng đường chuẩn để định lượng tuyệt đối
- D.
  Không cần DNA khuôn làm mẫu đầu vào
Q 13.
Khi thiết kế mồi PCR, cặp mồi có Tm tương đương nhưng vẫn có thể tạo primer-dimer. Nguyên nhân có khả năng nhất là:
- A.
  Hai mồi có các đoạn bổ sung tương ứng ở đầu 3'
- B.
  Hai mồi có tổng chiều dài ngắn hơn 18 nucleotide
- C.
  DNA polymerase không có hoạt tính exonuclease
- D.
  Nhiệt độ kéo dài quá 72°C
Q 14.
Mẫu cho kết quả dương tính trên PCR nhưng đối chứng nội không xuất hiện. Cách diễn giải nào là hợp lý nhất?
- A.
  Kết quả chắc chắn dương tính vì tín hiệu mục tiêu đã xuất hiện
- B.
  Có thể mẫu bị ức chế PCR hoặc chất lượng mẫu không đạt, cần kiểm tra lại
- C.
  Phản ứng chắc chắn là Multiplex PCR
- D.
  Không cần làm gì vì đây là kết quả bình thường ở mọi loại mẫu
Q 15.
Taq polymerase thường được chọn cho PCR thường vì tính chất nào?
- A.
  Có độ chính xác cao nhất và không bao giờ sai sót
- B.
  Chịu nhiệt tốt, tốc độ nhanh, hiệu suất cao và chi phí thấp
- C.
  Có hoạt tính sửa sai 3'-5' exonuclease mạnh
- D.
  Chỉ có thể dùng để khuếch đại RNA
Q 16.
Trong một phản ứng Multiplex PCR nhằm sàng lọc đồng thời ba mầm bệnh, điều nào có thể làm giảm độ nhạy so với PCR đơn mục tiêu?
- A.
  Sự cạnh tranh về nguồn dNTP, enzyme và các mồi khi có nhiều mục tiêu trong cùng ống
- B.
  Việc sử dụng cùng một loại DNA polymerase cho tất cả các mục tiêu
- C.
  Multiplex PCR không thể sử dụng đầu tip có màng lọc
- D.
  Mọi mục tiêu trong Multiplex PCR đều phải có cùng một Tm
Q 17.
Kết quả PCR dương tính trên mẫu môi cho thấy sự hiện diện của DNA tác nhân. Điều nào không được suy ra trực tiếp từ kết quả này?
- A.
  Tác nhân có mặt trong mẫu ở mức DNA có thể phát hiện
- B.
  Tác nhân còn sống hoặc đang hoạt động gây bệnh
- C.
  Có DNA tác nhân trong mẫu đã được khuếch đại đủ để vượt ngưỡng phát hiện
- D.
  Trình tự mục tiêu đã được khuếch đại bằng cặp mồi đặc hiệu
Q 18.
Ở pha log của PCR, hiệu suất khuếch đại tương đối ổn định. Vì sao pha này quan trọng đối với định lượng bằng qPCR?
- A.
  Vì ở pha này sản phẩm tăng theo cấp số nhân, nên thay đổi Ct phản ánh thay đổi lượng mục tiêu ban đầu
- B.
  Vì ở pha này không còn dNTP nên PCR tự động dừng
- C.
  Vì ở pha này mọi mẫu đều có cùng một Ct
- D.
  Vì ở pha này DNA khuôn không bị biến tính nữa
Q 19.
Một mẫu RNA được phân tích bằng RT-qPCR nhưng kết quả cho thấy có tín hiệu ở gen mục tiêu dù đã thực hiện điều khiển không có bước reverse transcription. Nguyên nhân có khả năng cao nhất là:
- A.
  DNA genomic lẫn vào mẫu RNA đã được khuếch đại trực tiếp bởi PCR
- B.
  Reverse transcriptase tự động tạo tín hiệu dương giả
- C.
  Taq polymerase tự chuyển RNA thành DNA
- D.
  SYBR Green tự khuếch đại RNA
Q 20.
Một nghiên cứu cần khuếch đại đồng thời nhiều mục tiêu trong một ống để tiết kiệm mẫu và thời gian, nhưng không cần định lượng tuyệt đối. Lựa chọn tốt nhất là:
- A.
  Multiplex PCR
- B.
  Digital PCR
- C.
  Nested PCR
- D.
  PCR thường với một cặp mồi duy nhất

Answers and explanations are in mode.