Kỹ thuật di truyền (PCR) 2026 TP. Hồ Chí Minh HUIT University

Trắc nghiệm PCR – Chương 2 – 30 câu có lời giải từng lựa chọn

30 questions

30 min

Answer key

Exam info

Subject: Kỹ thuật di truyền (PCR)
Exam type: University
Questions: 30
Duration: 30 min
Year: 2026
Answers: ✓ With explanations
School: Đại học Công nghiệp TP.HCM (HUIT)

Structure (2 parts)

1.
Đọc multiplex (2 Q)

Quy ước băng A = 400 bp, B = 250 bp, nội kiểm = 600 bp.
2.
Melting curve (1 Q)

Đọc dữ kiện đỉnh nóng chảy SYBR để trả lời câu hỏi.

Questions (30)

Q 1.
Phát biểu nào phù hợp với các mốc trong bài giảng?
- A.
  Mullis đề xuất PCR năm 1983, nhận Nobel Hóa học năm 1993
- B.
  Sanger đề xuất PCR năm 1977, nhận Nobel năm 1993
- C.
  Mullis đề xuất PCR năm 1993, nhận Nobel năm 1983
- D.
  Watson và Crick đề xuất PCR năm 1953
Q 2.
Vì sao PCR thông thường dùng hai mồi trên hai mạch đối diện?
- A.
  Để hai polymerase tổng hợp theo hai chiều hóa học khác nhau
- B.
  Để giới hạn vùng đích và tạo sản phẩm làm khuôn qua các chu kỳ
- C.
  Để thay thế hoàn toàn bước biến tính
- D.
  Để chuyển RNA thành DNA
Q 3.
Thứ tự các bước trong một chu kỳ PCR là gì?
- A.
  Bắt cặp → kéo dài → biến tính RNA
- B.
  Kéo dài → bắt cặp → biến tính
- C.
  Biến tính → bắt cặp → kéo dài
- D.
  Biến tính → nối DNA → phiên mã
Q 4.
Giảm nhiệt độ bắt cặp quá thấp thường gây hậu quả nào?
- A.
  Giảm mọi khả năng mồi gắn vào khuôn
- B.
  Tăng proofreading của Taq
- C.
  Tự động làm mất mọi primer-dimer
- D.
  Tăng khả năng khuếch đại ngoài đích
Q 5.
Cùng enzyme và điều kiện, amplicon dài hơn thường cần điều chỉnh gì?
- A.
  Tăng thời gian kéo dài phù hợp tốc độ enzyme
- B.
  Bỏ bước bắt cặp
- C.
  Đổi mọi dNTP thành ddNTP
- D.
  Giảm số mồi từ hai xuống một
Q 6.
Cần tạo insert dùng nhân dòng và hạn chế sai nucleotide. Đặc tính enzyme nào nên ưu tiên?
- A.
  Hoạt tính phân giải RNA mạnh
- B.
  Proofreading exonuclease 3′→5′
- C.
  Khả năng cắt đầu dò 5′→3′ là đủ
- D.
  Khả năng hoạt động ở nhiệt độ thấp là đủ
Q 7.
Nếu Mg²⁺ quá thấp, phản ứng PCR có thể gặp vấn đề nào?
- A.
  Tăng đặc hiệu đến mức luôn đạt kết quả tối ưu
- B.
  Tăng số bản sao dù không có khuôn
- C.
  Giảm hoạt động polymerase và giảm lượng sản phẩm
- D.
  Chuyển thành RT-PCR
Q 8.
Tăng lượng DNA thô vào PCR nhưng băng đích yếu hơn. Giải thích nào hợp lý?
- A.
  DNA nhiều luôn làm polymerase biến thành RNase
- B.
  Tất cả khuôn đều bị chuyển thành mồi
- C.
  Nồng độ khuôn không bao giờ ảnh hưởng PCR
- D.
  Chất ức chế đi kèm DNA thô cũng tăng
Q 9.
Đầu bên phải của mạch tham chiếu là 5′-…AGTCCG-3′. Mồi ngược minh họa viết theo 5′→3′ là gì?
- A.
  CGGACT
- B.
  TCAGGC
- C.
  GCCTGA
- D.
  AGTCCG
Q 10.
Đối chứng nào trực tiếp giám sát nhiễm trong cả chuỗi tách chiết của một lô mẫu?
- A.
  Đối chứng dương PCR
- B.
  Mẫu trắng tách chiết
- C.
  Ladder DNA
- D.
  Mẫu đã biết dương tính nhưng không qua tách chiết
Q 11.
NTC có băng đúng kích thước đích. Cách xử lý hợp lý nhất là gì?
- A.
  Kết luận mọi mẫu đều dương tính
- B.
  Chấp nhận kết quả nếu mẫu đậm hơn NTC
- C.
  Kiểm tra nguồn nhiễm và lặp lại với đối chứng hợp lệ
- D.
  Loại NTC khỏi báo cáo để giảm nhiễu
Q 12.
Mẫu âm tính với đích và cũng âm tính với nội kiểm được kỳ vọng phải dương. Đối chứng dương của lần chạy đạt. Kết luận nào phù hợp?
- A.
  Mẫu chắc chắn không có đích
- B.
  Hệ PCR của toàn bộ lần chạy chắc chắn hỏng
- C.
  Mẫu chắc chắn có đích
- D.
  Cần xem xét ức chế hoặc vấn đề xử lý riêng mẫu
Q 13.
RNA cần được khuếch đại bằng PCR. Bước bổ sung thiết yếu là gì?
- A.
  Tổng hợp cDNA nhờ reverse transcriptase
- B.
  Cắt RNA bằng enzyme giới hạn DNA
- C.
  Thay dNTP bằng amino acid
- D.
  Nối trực tiếp RNA vào Taq
Q 14.
Muốn ưu tiên mRNA có đuôi poly(A), nên chọn mồi nào cho bước phiên mã ngược?
- A.
  Mồi chỉ gồm guanine
- B.
  Oligo(dT)
- C.
  Mồi chỉ gồm cytosine
- D.
  Một cặp mồi DNA bất kỳ
Q 15.
Vì sao nested PCR tăng tính đặc hiệu nhưng làm tăng nguy cơ nhiễm?
- A.
  Chỉ sử dụng một mồi ở cả hai vòng
- B.
  Dùng enzyme không chịu nhiệt
- C.
  Vòng hai chọn vùng bên trong, còn chuyển sản phẩm làm tăng nguy cơ carry-over
- D.
  Mọi sản phẩm vòng một đều bị phân hủy hoàn toàn
Q 16.
Thách thức đặc trưng khi đưa nhiều cặp mồi vào cùng phản ứng là gì?
- A.
  DNA mất điện tích âm
- B.
  Mọi amplicon đều bắt buộc bằng nhau
- C.
  Polymerase chỉ nhận diện một loại nucleotide
- D.
  Mồi tương tác, cạnh tranh và cần điều kiện bắt cặp tương thích
Đọc multiplex

Quy ước băng A = 400 bp, B = 250 bp, nội kiểm = 600 bp.

Quy ước băng A = 400 bp, B = 250 bp, nội kiểm = 600 bp. Trong hệ phân biệt hai allele ở cơ thể lưỡng bội và đối chứng hợp lệ.
Q 17.
Quy ước băng A = 400 bp, B = 250 bp, nội kiểm = 600 bp. Trong hệ phân biệt hai allele ở cơ thể lưỡng bội và đối chứng hợp lệ, mẫu có cả ba băng phù hợp kiểu gene nào?
- A.
  AB
- B.
  AA
- C.
  BB
- D.
  Không xác định vì mất nội kiểm
Q 18.
Mẫu chỉ có 600 và 250 bp, các đối chứng đều đạt. Kiểu gene phù hợp nhất là gì?
- A.
  AA
- B.
  BB
- C.
  AB
- D.
  Không có DNA trong mẫu
Q 19.
Threshold trong qPCR được hiểu như thế nào?
- A.
  Nhiệt độ DNA tách đôi hoàn toàn
- B.
  Số chu kỳ cuối cùng được cài trên máy
- C.
  Ngưỡng tín hiệu dùng xác định chu kỳ vượt nền trong vùng phân tích phù hợp
- D.
  Kích thước nhỏ nhất mà gel phân tách được
Q 20.
Hai mẫu cùng phép thử và hiệu suất 100%, X có Ct 21, Y có Ct 24. Lượng đích ban đầu X/Y là bao nhiêu?
- A.
  1/8
- B.
  3
- C.
  6
- D.
  8
Q 21.
Mẫu thử có Ct đích/tham chiếu 23/19, đối chứng 26/20. Theo 2^(−ΔΔCt), biểu hiện thử/đối chứng là bao nhiêu?
- A.
  4
- B.
  2
- C.
  1/4
- D.
  8
Q 22.
Điều kiện nào hỗ trợ áp dụng công thức 2^(−ΔΔCt) đáng tin cậy?
- A.
  Gene tham chiếu thay đổi mạnh theo xử lý
- B.
  Gene tham chiếu ổn định và hiệu suất hai phép thử tương đương, gần giả định gấp đôi
- C.
  Chỉ cần Ct gene đích thấp
- D.
  Mọi phản ứng đều có cùng độ sáng ở plateau
Q 23.
Đường chuẩn Ct = −3,32 × log₁₀(N) + 38,00, với N là bản sao/phản ứng. Ct mẫu = 28,04 nằm trong khoảng chuẩn. N bằng bao nhiêu?
- A.
  100
- B.
  10.000
- C.
  1.000
- D.
  28,04
Q 24.
Hạn chế nào gắn trực tiếp với cơ chế phát hiện của SYBR Green?
- A.
  Không thể phát tín hiệu khi có DNA sợi kép
- B.
  Luôn cần đầu dò riêng cho mỗi đích
- C.
  Chỉ phát hiện RNA
- D.
  Có thể ghi nhận cả sản phẩm ngoài đích và primer-dimer
Q 25.
Hoạt tính nào của Taq góp phần tạo tín hiệu với đầu dò TaqMan?
- A.
  Nuclease 5′→3′ cắt đầu dò, tách reporter khỏi quencher
- B.
  Proofreading 3′→5′ tổng hợp reporter
- C.
  Reverse transcriptase tạo quencher
- D.
  Ligase nối hai đầu dò
Melting curve

Đọc dữ kiện đỉnh nóng chảy SYBR để trả lời câu hỏi.

Mẫu SYBR có đỉnh chính ở 85 °C, đỉnh phụ ở 76 °C. NTC cũng có đỉnh ở 76 °C.
Q 26.
Mẫu SYBR có đỉnh chính ở 85 °C, đỉnh phụ ở 76 °C. NTC cũng có đỉnh ở 76 °C. Diễn giải phù hợp nhất là gì?
- A.
  Chắc chắn có hai gene đích khác nhau
- B.
  Đỉnh phụ gợi ý primer-dimer hoặc sản phẩm phụ, cần kiểm tra thêm
- C.
  Mẫu chắc chắn âm tính vì có hai đỉnh
- D.
  Đỉnh 76 °C chứng minh gene đích bị mất
Q 27.
Vì sao cần hiệu chỉnh Poisson trong dPCR?
- A.
  Vì mọi phân vùng dương đều có đúng một bản sao
- B.
  Vì chỉ phân vùng âm chứa DNA
- C.
  Vì một phân vùng dương có thể chứa nhiều bản sao
- D.
  Vì dPCR đo Ct riêng cho từng phân vùng
Q 28.
Có 2.000 vùng âm trên 8.000 vùng hợp lệ. Với λ = −ln(p₀), số bản sao trung bình/vùng gần nhất là bao nhiêu?
- A.
  0,25
- B.
  0,75
- C.
  4,00
- D.
  1,386
Q 29.
Giảm nhiệt độ bắt cặp giúp xuất hiện băng đích yếu nhưng đồng thời sinh nhiều băng phụ. Nhận định nào phù hợp nhất?
- A.
  Khả năng phát hiện tăng nhưng tính đặc hiệu có thể giảm
- B.
  Độ nhạy và đặc hiệu luôn cùng tăng
- C.
  Độ trung thực chắc chắn tăng
- D.
  PCR đã trở thành dPCR
Q 30.
Muốn định lượng biến thể hiếm trong nền DNA nhiều và không xây dựng đường chuẩn qPCR, lựa chọn phù hợp để cân nhắc là gì?
- A.
  PCR điểm cuối rồi chỉ nhìn độ đậm băng
- B.
  dPCR với phép thử phân biệt biến thể đã được kiểm chứng
- C.
  Tăng vô hạn số chu kỳ PCR thường
- D.
  Bỏ toàn bộ đối chứng để giảm chi phí

Answers and explanations are in mode.